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大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA的克隆与表达
引用本文:郑旭,张志和,胡细连,廖鸣娟,张安居,朱睦元. 大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA的克隆与表达[J]. 遗传学报, 2004, 31(9): 963-969
作者姓名:郑旭  张志和  胡细连  廖鸣娟  张安居  朱睦元
作者单位:1. 浙江大学生命科学学院遗传学研究所,杭州,310012
2. 浙江大学生命科学学院遗传学研究所,杭州,310012;成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危动物繁殖与保护遗传重点实验室,成都,610081
3. 浙江大学生命科学学院遗传学研究所,杭州,310012;杭州师范学院生命科学学院,杭州,310012
4. 成都大熊猫繁育研究基地,四川省濒危动物繁殖与保护遗传重点实验室,成都,610081
基金项目:国家自然科学基金,成都大熊猫繁育研究基金会资助项目,Oakland -China野生动物保护基金项目资助
摘    要:从大熊猫脑垂体中提取总RNA,利用RT-PCR技术,首次扩增出大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA序列(GenBank登录号:AY161285)。结果表明,大熊猫PRL cDNA的开放阅读框为687bp,编码含229个氨基酸残基的前体蛋白。将克隆的PRL cDNA片段构建到表达质粒pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21,在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下表达PRL蛋白。SDS—PAGE电泳结果表明,表达的PRL蛋白为不可溶蛋白。蛋白质同源性比较显示,大熊猫与猪、猫的同源性大于95%,与人、牛、山羊的在70%~80%之间,与小鼠、大鼠的分别为45.9%和52%。大熊猫aa^64为丝氨酸,是亲水性氨基酸;而猫、牛、山羊(脯氨酸)和人(丙氨酸)aa^64是疏水性氨基酸。在二级结构上,aa^64在第一α螺旋与第二α螺旋之间,极性的差别可能导致蛋白空间结构的不同。

关 键 词:大熊猫 垂体泌乳素 cDNA克隆 表达
文章编号:0379-4172(2004)09-0963-07

Cloning and Expression of Pituitary Prolactin Gene in Ailuropoda melanoleuca
ZHENG Xu,ZHANG Zhi-He. Cloning and Expression of Pituitary Prolactin Gene in Ailuropoda melanoleuca[J]. Journal of Genetics and Genomics, 2004, 31(9): 963-969
Authors:ZHENG Xu  ZHANG Zhi-He
Affiliation:ZHENG Xu~1,ZHANG Zhi-He~
Abstract:
Keywords:Ailuropoda melanoleuca  PRL  cDNA cloning  expression
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