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小鼠巨噬细胞系体外感染BCG的应答
引用本文:胡茂志,陈义芳,韩璐,季琰,郑佳玉,孟闯,周海霞,陈祥,焦新安,刘秀梵. 小鼠巨噬细胞系体外感染BCG的应答[J]. 微生物学报, 2010, 50(3): 373-379
作者姓名:胡茂志  陈义芳  韩璐  季琰  郑佳玉  孟闯  周海霞  陈祥  焦新安  刘秀梵
作者单位:扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省物质微区与性能测试服务中心,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009;扬州大学江苏省人兽共患病重点实验室,扬州 225009
基金项目:973计划(2006CB504404);国家科技重大专项(2008ZX10003-010);国家公益性行业科研专项(200903027);江苏省科技攻关计划(BE2007340)
摘    要:摘要:【目的】探讨小鼠巨噬细胞系RAW264.7体外感染BCG的应答。【方法】体外感染RAW264.7细胞23 h后,分析细胞形态和细胞表面共刺激分子的表达。然后去除培养上清中的BCG,继续培养不同时间,通过CFSE、annexin V/PI和Rh123标记,分析宿主细胞的应答。【结果】BCG感染23h后,细胞生长状态良好,细胞内能明显观察到吞噬泡中的BCG。细胞表面共刺激分子CD40、CD54、CD80、CD86、CD11b的表达明显升高,CD11c、I-Ad以及H-2Kd的表达变化不明显。CFSE标记BCG后,随着培养时间的延长,荧光强度逐渐减弱,但是4天后仍然明显地高于对照组。除去培养上清中的BCG后继续培养,含有BCG的细胞逐渐减少,继续培养60 h后基本检测不到。另外,BCG感染不能诱导细胞凋亡,线粒体膜电位先升高后降低,5天后,基本上与对照组一致。【结论】通过以上分析,为BCG免疫机理的研究提供了重要数据。

关 键 词:关键词:卡介苗,RAW264.7,细胞凋亡,共刺激分子,线粒体膜电位
收稿时间:2009-11-20
修稿时间:2009-12-28

The response of mouse macrophage cell line infected with BCG in vitro
Maozhi Hu,Yifang Chen,Lu Han,Jiayu Zheng,Yan Ji,Chuang Meng,Haixia Zhou,Chen Xiang,Xinan Jiao and Xiufan Liu. The response of mouse macrophage cell line infected with BCG in vitro[J]. Acta microbiologica Sinica, 2010, 50(3): 373-379
Authors:Maozhi Hu  Yifang Chen  Lu Han  Jiayu Zheng  Yan Ji  Chuang Meng  Haixia Zhou  Chen Xiang  Xinan Jiao  Xiufan Liu
Affiliation:Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Test and Service Cener for Material Microanalysis and Property, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Key Laboratory of Zoonesis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
Abstract:[Objective]To illuminate the response of mouse macrophage cell line RAW264.7 after infected with Bacille Calmette-Guerin (BCG) in vitro. [Methods] We analyzed the morphology and expression of co-stimulatory molecules on the surface of RAW264.7 after exposure to BCG for 23 hours. Then during the different culture time after discard the BCG in the supernatant, we analyzed the response of RAW264.7 by flow cytometry using carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester (CFDA-SE), annexin V/PI and Rhodamine 123...
Keywords:BCG  RAW264.7  apoptosis  co-stimulatory molecule  mitochondrial membrane potential  
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