烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白Ⅱ cDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达 |
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作者姓名: | 巩中军 原国辉 郭线茹 安世恒 |
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作者单位: | 1. 河南农业大学植物保护学院,郑州,450002 2. 浙江大学应用昆虫学研究所,杭州,310029 |
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基金项目: | 河南省自然科学基金资助项目 (0 3 110 3 170 0 ) |
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摘 要: | 利用RT PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpa assulta雌、雄虫触角普通气味结合蛋白Ⅱ的Cdna片段,将其克隆至Pgem-T Easy载体,获得了普通气味结合蛋白Ⅱ基因成熟蛋白阅读框序列。将该基因重组到表达型质粒Pet-30a(+)中,并转化入原核细胞中表达。序列测定结果表明,烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白基因的成熟蛋白阅读框全长489 bp,编码162个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为18.2 kD和5.35。推导的氨基酸序列与已报道的10种昆虫普通气味结合蛋白Ⅱ高度同源(73%~98%),并具有气味结合蛋白的典型特征。SDS-PAGE和Western印迹分析表明,经IPTG诱导,普通气味结合蛋白Ⅱ基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,电泳检测到一条约23 kD大小的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相应。
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关 键 词: | 烟实夜蛾 普通气味结合蛋白 触角 基因克隆 原核表达 |
文章编号: | 0454-6296(2005)01-0018-06 |
修稿时间: | 2003-11-12 |
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