番茄SlWRKY31基因启动子的克隆与逆境应答模式分析 |
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引用本文: | 高永峰,杨丰铭,李琴中,张国燕,王 丹,姚银安,刘继恺. 番茄SlWRKY31基因启动子的克隆与逆境应答模式分析[J]. 西北植物学报, 2018, 38(12): 2155-2164 |
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作者姓名: | 高永峰 杨丰铭 李琴中 张国燕 王 丹 姚银安 刘继恺 |
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作者单位: | (西南科技大学 生命科学与工程学院,四川绵阳 621010) |
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基金项目: | 四川省教育厅科研项目(17ZB0456); |
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摘 要: | 该研究以野生型番茄(Solanum lycopersicum)为材料,采用PCR技术克隆得到了番茄 SlWRKY31 基因起始密码子 ATG 上游启动子序列,并利用该启动子驱动 GUS基因在野生型番茄中表达,对获得的转基因番茄采用不同胁迫处理后进行GUS 染色和定量分析。结果表明:(1)序列分析显示,该启动子全长1 849 bp,含有多个与非生物胁迫和激素响应相关的顺式作用元件,主要包括热胁迫响应元件 HSE、干旱诱导响应元件 MBS、防卫和胁迫响应元件 TC rich repeats、创伤诱导响应元件 WUN motif、脱落酸(ABA)响应元件 ABRE 和水杨酸(SA)响应元件 TCA element。(2)实时荧光定量 PCR 结果显示,SlWRKY31 基因呈组成型表达模式,且在叶和果实中表达量较高,茎中较低;在NaCl、甘露醇、SA、ABA 和42 ℃ 高温的胁迫处理下,其表达量显著升高。(3)构建 SlWRKY31 启动子和 GUS 基因融合的植物表达载体,并通过农杆菌介导法将其转化野生型番茄,对获得的转基因番茄进行 GUS 组织化学染色分析结果显示,SlWRKY31 基因在番茄的各个组织(根、茎、叶、花、果实和种子)中均有表达,表明 SlWRKY31 启动子是组成型表达启动子。(4)对转基因番茄在不同胁迫处理后的 GUS 染色和定量分析显示,SlWRKY31 启动子显著受到NaCl、甘露醇、SA、ABA 和42 ℃ 高温的诱导表达,说明该启动子是一个可以响应多种逆境胁迫的诱导型启动子。
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关 键 词: | 番茄;SlWRKY31启动子;逆境胁迫;β 半乳糖苷酶; GUS 染色分析 |
Cloning and Analysis of Stress Response Pattern of SlWRKY31 Gene Promoter from Tomato |
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