| 广藿香原生质体制备、培养与融合技术优化研究 |
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| 引用本文： | 严寒静,李 磊,张宏意,何梦玲.广藿香原生质体制备、培养与融合技术优化研究[J].广西植物,2018,38(10):1310-1318. |
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| 作者姓名： | 严寒静 李 磊 张宏意 何梦玲 |
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| 作者单位： | 1. 广东药科大学 中药学院, 广州 510006; 2. 国家中医药管理局 岭南药材生产与开发重点研究室, 广州 510006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81773829); 广东省科技项目(2015A030302084,2017A030303082,2017A030303081); 广东省中管局项目(20163010)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(81773829); Guangdong Science and Technology Program(2015A030302084, 2017A030303082, 2017A030303081); Guangdong Provincial Administration of Traditional Chinese Medicine(20163010)]。 |
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| 摘 要： | 为建立高效稳定的广藿香原生质体培养与融合技术体系,该研究以广藿香愈伤组织悬浮细胞为材料,研究了原生质体制备的酶解条件和培养方法、细胞密度、激素种类和浓度等因素对原生质体培养的影响,并通过测定融合产物直径确立融合细胞筛选范围,进一步研究聚乙二醇浓度、细胞密度、融合时间及融合液加入量等因素对原生质体融合的影响。结果表明:制备原生质体的适宜条件为pH5.8,酶解温度25 ℃; 原生质体培养以铵盐减半的MS1培养基进行海藻酸钠包埋、激素选用0.2 mg·L-1 NAA、2.0 mg·L-1 6-BA,培养密度2.0×105个·mL-1、蔗糖添加量1.0%、酸水解酪蛋白500 mg·L-1的条件下原生质体分裂频率、植板率均较高,且开始分裂时间和细胞团形成时间都较短; 双细胞融合产物筛选范围为69.33～87.35 μm; 以40% PEG 6000化学促融30 min、加入0.5倍体积的融合液、细胞密度2.0×105个·mL-1的条件进行原生质体融合,聚合率可达57.19%; 获得的融合产物经海藻酸钠包埋培育2个月后可观察到再生愈伤组织。
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| 关 键 词： | 广藿香 聚乙二醇 原生质体制备 原生质体融合 新品种选育 |
| 收稿时间： | 2018/2/9 0:00:00 |
Optimization of protoplasts preparation, culture
and fusion in Pogostemon cablin |
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| YAN Hanjing,LI Lei,ZHANG Hongyi,HE Mengling.Optimization of protoplasts preparation, culture
and fusion in Pogostemon cablin[J].Guihaia,2018,38(10):1310-1318. |
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| Authors: | YAN Hanjing LI Lei ZHANG Hongyi HE Mengling |
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| Institution: | 1. College of Traditional Medicine, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 2. Key Laboratory of State
Administration of Traditional Chinese Medicine for Production & Development of Cantons Medicinal Materials, Guangzhou 510006, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pogostemon cablin PEG protoplast preparation protoplast fusion breeding |
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