‘云香’水仙NtNAC2基因的克隆及功能分析

该研究选用多花水仙新品种‘云香’为材料，采用RT PCR技术克隆得到NtNAC2，其开放阅读框为936 bp，编码311个氨基酸。生物信息学分析显示，NtNAC2在N端含有NAM保守结构域，与单子叶植物芦笋、番红花和石斛等具有较近的进化关系。实时荧光定量检测显示，花瓣和副冠中NtNAC2基因的表达量随花器官发育逐渐上升，衰败期达到峰值；在ABA、MeJA、SA、H₂O₂、50 ℃、NaCl和PEG胁迫处理下，水仙根和叶中NtNAC2基因的表达量上调，且表现出时空表达特异性。为进一步鉴定其功能，构建植物表达载体转化烟草，获得10株转基因烟草，经半定量RT PCR检测NtNAC2在转基因植株中过表达。高盐和干旱胁迫处理后转基因植株根长为野生型的2~3倍，叶片失水率低于30%，存活率高于60%。研究表明，‘云香’水仙NtNAC2的过量表达提高了转基因烟草的抗旱性和耐盐性，可作为水仙抗逆分子育种的重要候选基因。