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负压渗透处理对花粉管加载荧光染料的影响
引用本文:李 坤,王永章,屈海泳.负压渗透处理对花粉管加载荧光染料的影响[J].西北植物学报,2018,38(11):2138-2147.
作者姓名:李 坤  王永章  屈海泳
作者单位:(青岛农业大学 园艺学院,山东青岛 266109)
基金项目:青岛农业大学博士基金和山东省水果产业技术体系
摘    要:该研究采用负压渗透技术,以正常培养2 h的丰水梨花粉为实验材料,探索负压渗透条件下,花粉管中加载Ca2+荧光探针(Fluo 4/AM)的方法。结果显示:(1)将花粉及花粉管进行负压处理2 h,花粉萌发率及花粉管的活性没有受到影响。(2)对培养2 h后的花粉管进行不同条件下的负压渗透处理,辅助荧光探针Fluo 4/AM进入花粉管;激光共聚焦显微镜观察发现,在低温(4 ℃)条件下,负压(-80 kPa)渗透加载荧光探针30 min,花粉管尖端可以观察到明显的Ca2+梯度。(3)抑制花粉管外Ca2+内流或降低花粉管外Ca2+浓度,花粉管中荧光密度也显著降低。研究认为,负压渗透辅助加载的方法可以有效促进荧光探针进入花粉管细胞内与Ca2+结合。

关 键 词:Ca2+荧光探针  Ca2+梯度  花粉管  激光共聚焦  负压渗透

Effect of Vacuum Infiltration Treatment on the Loading of Fluorescent Dye into Pollen Tubes
LI Kun,WANG Yongzhang,QU Haiyong.Effect of Vacuum Infiltration Treatment on the Loading of Fluorescent Dye into Pollen Tubes[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2018,38(11):2138-2147.
Authors:LI Kun  WANG Yongzhang  QU Haiyong
Abstract:
Keywords:Ca2+ fluorescent probe  Ca2+ gradient  pollen tube  laser scanning confocal microscopy  vacuum infiltration
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