芜菁UF3GT基因的克隆及表达特性 |
| |
引用本文: | 许志茹,佟玲,侯杰,崔国新.芜菁UF3GT基因的克隆及表达特性[J].生物技术通讯,2012,23(2):232-237,266. |
| |
作者姓名: | 许志茹 佟玲 侯杰 崔国新 |
| |
作者单位: | 东北林业大学生命科学学院,林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨150040 |
| |
基金项目: | 黑龙江省博士后科研启动金(LBH-Q08146);中央高校基本科研业务费专项资金(DLl0CA03) |
| |
摘 要: | 目的:克隆‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的UDP-葡萄糖∶类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(UF3GT)基因并研究其表达特性。方法:利用RT-PCR方法克隆‘津田’芜菁BrUF3GT1基因和‘赤丸’芜菁BrUF3GT2基因,并进行生物信息学分析;通过Northern杂交检测BrUF3GT1和BrUF3GT2基因的UV-A诱导表达特性;对BrUF3GT1和BrUF3GT2基因进行原核诱导表达。结果:BrUF3GT1和BrUF3GT2的开放读框为1407 bp,编码468个氨基酸残基;氨基酸序列分析显示,BrUF3GT1和BrUF3GT2与拟南芥UF3GT的同源性为87%,从第16~453位氨基酸残基的肽段具有糖基转移酶家族成员的结构域;BrUF3GT1和BrUF3GT2基因具有高度同源性,核苷酸序列在7个位点存在差异,推导的氨基酸序列在1个位点存在差异;Northern杂交结果显示,UV-A可以诱导BrUF3GT1和BrUF3GT2基因表达,基因的表达量与处理时间相关;原核诱导表达及纯化后可以获得相对分子质量分别约为51.88×103和51.89×103的BrUF3GT1和BrUF3GT2蛋白。结论:克隆了‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁的UF3GT基因,为初步阐明2种芜菁的花青素生物合成机理奠定了实验基础。
|
关 键 词: | 芜菁 UDP-葡萄糖∶类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶 基因克隆 序列分析 基因表达 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
|