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| 应用RNA干扰沉默猪内源性反转录病毒 | |
| 引用本文： | 孙宇,马玉媛,罗佳,章金刚.应用RNA干扰沉默猪内源性反转录病毒[J].生物技术通讯,2012,23(1):52-55. |
| 作者姓名： | 孙宇 马玉媛 罗佳 章金刚 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院野战输血研究所,北京100850;解放军第305医院检验科,北京100017 2. 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 3. 广西大学兽医学院,广西南宁,530004 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（3107185） |
| 摘 要： | 目的:尝试应用RNA干扰(RNAi)沉默猪源PK-15细胞中的猪内源性反转录病毒(PERV),并通过反转录酶活性及pol基因相对荧光定量PCR检测沉默效果。方法:依据GenBank公布的PERV pol基因序列,采用Invitro-gen公司的BLOCK-iT RNAi Designer软件设计Stealth小干扰RNA(siRNA)序列;将合成的siRNA转染PK-15细胞,72 h后检测细胞上清PERV反转录酶活性及细胞内pol基因拷贝数并评价沉默效果。结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272～3296 bp的序列能有效沉默PERV。结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV沉默,为进一步研究天然抗病毒分子与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源异种移植研究中去除PERV提供了一种可供尝试的方法。 |
| 关 键 词： | RNA干扰 基因沉默 猪内源性反转录病毒 |
Inhibiting of Porcine Endogenous Retrovirus in PK-15 Cells by RNA Interference with Stealth siRNA |
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| SUN Yu , MA Yu-Yuan , LUO-Jia , ZHA NG Jin-Gang.Inhibiting of Porcine Endogenous Retrovirus in PK-15 Cells by RNA Interference with Stealth siRNA[J].Letters in Biotechnology,2012,23(1):52-55. | |
| Authors: | SUN Yu MA Yu-Yuan LUO-Jia ZHA NG Jin-Gang |
| Institution: | 1.Institute of Transfusion Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850; 2.The 305 Military Hospital,Beijing 100017;3.Guangxi University,Nanning 530004;China |
| Abstract: | |
| Keywords: | RNA interference gene silence porcine endogenous retrovirus |
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