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棉花磷脂酶C基因的克隆及参与油脂代谢的功能分析
引用本文:梁 卓,谭 兰,袁哈利,谢全亮,王 斐,李鸿彬. 棉花磷脂酶C基因的克隆及参与油脂代谢的功能分析[J]. 西北植物学报, 2015, 35(6): 1085-1091
作者姓名:梁 卓  谭 兰  袁哈利  谢全亮  王 斐  李鸿彬
作者单位:(石河子大学 生命科学学院,农业生物技术重点实验室,新疆石河子 832003)
基金项目:兵团项目(2012BB050,2014CD003);国家自然科学基金(31260039);石河子大学杰青项目(2012ZRKXJQ03)
摘    要:以陆地棉胚珠和纤维为实验材料,利用RT-PCR技术克隆得到磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)基因(GhPLC,GenBank登录号:KR154219),将棉花磷脂酶C基因转化拟南芥,分析其在油脂代谢过程中的重要作用。测序鉴定显示,GhPLC基因的全长开放读码框为1 524bp,编码包含508个氨基酸的蛋白质,理论分子量约为55kD。序列比对分析显示,GhPLC属于典型的碱性磷酸酶超家族的磷脂酶。利用pET32a-GhPLC原核表达获得分子量约为55kD左右的重组蛋白GhPLC;酶活力分析显示,重组GhPLC蛋白具有较高的将卵磷脂(PC)催化为二酰甘油(DAG)的酶活力。半定量RT-PCR结果表明,GhPLC基因参与棉花种子和纤维发育过程。构建植物过量表达载体35S∷GhPLC并转化哥伦比亚野生型拟南芥,转基因拟南芥中GhPLC基因的表达和PLC酶活力显著提高,且转基因拟南芥种子的油脂含量提高了5.3%。

关 键 词:棉花  胚珠和纤维  磷脂酶C  油脂含量  拟南芥

Cloning of a Phospholipase C Gene from Gossypium hirsutum and Its Functional Analysis of Participating in Lipid Metabolism
LIANG Zhuo,TAN Lan,YUAN Hali,XIE Quanliang,WANG Fei,LI Hongbin. Cloning of a Phospholipase C Gene from Gossypium hirsutum and Its Functional Analysis of Participating in Lipid Metabolism[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2015, 35(6): 1085-1091
Authors:LIANG Zhuo  TAN Lan  YUAN Hali  XIE Quanliang  WANG Fei  LI Hongbin
Abstract:
Keywords:Gossypium hirsutum  ovule and fiber  phospholipase C  oil content  Arabidopsis
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