| 抗人P185^erbB2的scFv—Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析 |
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| 引用本文： | 解志刚,郭宁,施明,冯建男,于鸣,孙瑛勋,沈倍奋. 抗人P185^erbB2的scFv—Fc融合蛋白的表达及免疫功能分析[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(4): 371-374 |
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| 作者姓名： | 解志刚 郭宁 施明 冯建男 于鸣 孙瑛勋 沈倍奋 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850(解志刚，郭宁，施明，冯建男，于鸣，孙瑛勋)，军事医学科学院基础医学研究所 北京100850(沈倍奋) |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863计划 )资助项目 (No .2 0 0 1AA2 15 0 81)~~ |
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| 摘 要： | 为提高鼠源单抗用于体内治疗的效应功能及降低人抗鼠抗体反应 ,将编码抗人P185 erbB2 单抗轻、重链可变区 (VL、VH)融合构建的单链抗体 (scFv)基因片段与人IgG1的Fc区基因片段融合构建了scFv Fc融合基因 ,并将其克隆到哺乳动物细胞表达载体pCIDN中。用重组载体转染CHO细胞 ,通过G4 18筛选获得稳定高表达克隆。更换无血清培养基培养 ,经重组蛋白质A亲和层析柱纯化scFv Fc融合蛋白。融合蛋白质在还原SDS PAGE中表现为5 2kD的条带 ;与SK BR 3细胞裂解液共培育可特异性地沉淀出P185 erbB2 蛋白 ;FACS分析表明融合蛋白质识别P185 erbB2 蛋白的胞外段 ;ELISA测定融合蛋白质对细胞表面抗原P185 erbB2 的亲和常数为 7.5× 10 -10 (mol/L) -1。构建scFv Fc融合基因 ,将其克隆到表达载体 ,进一步稳定表达抗P185 erbB2 的scFv Fc融合蛋白 ,为进一步的体外、体内研究鼠源单抗治疗效果创造了条件。
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| 关 键 词： | Her2/neu scFv 融合蛋白质 |
Expression and Characterization of Single-chain Fv-Fc Fusion Protein against Human P185~(erbB2) |
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| XIE Zhi-Gang,GUO Ning ,SHI Ming,FENG Jian-Nan,YU Ming,SUN Ying-Xun,SHEN Bei-Fen. Expression and Characterization of Single-chain Fv-Fc Fusion Protein against Human P185~(erbB2)[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(4): 371-374 |
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| Authors: | XIE Zhi-Gang GUO Ning SHI Ming FENG Jian-Nan YU Ming SUN Ying-Xun SHEN Bei-Fen |
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| Affiliation: | XIE Zhi-Gang,GUO Ning *,SHI Ming,FENG Jian-Nan,YU Ming,SUN Ying-Xun,SHEN Bei-Fen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Her2/neu scFv fusion protein |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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