| 广西眼镜蛇蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化及其对HSC-T6细胞的作用 |
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| 引用本文： | 付道莹,张学荣,付娆,张可星,侯瑞雪,班建东,农君,陈缨. 广西眼镜蛇蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化及其对HSC-T6细胞的作用[J]. 蛇志, 2015, 0(2): 99-102 |
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| 作者姓名： | 付道莹 张学荣 付娆 张可星 侯瑞雪 班建东 农君 陈缨 |
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| 作者单位： | 广西医科大学蛇毒研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81360078) |
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| 摘 要： | 目的对广西眼镜蛇毒中磷脂酶A2(PLA2)进行分离纯化,测定其对肝星状细胞HSC-T6的增殖抑制作用。方法采用Sephadex G-50凝胶层析柱、CM-Sepharose CL-6B离子交换柱、Macro-prep High S预装柱结合的方法分离广西眼镜蛇粗毒,经平板法测定各峰的PLA2活性;经SDS-PAGE电泳鉴定终产物纯度并测定分子量,NanoLC-ESI-MS/MS鉴定其组分;CCK-8法测定PLA2对肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用,确定其凋亡的最小毒性浓度。结果 Sephadex G-50凝胶层析柱、CM-Sepharose CL-6B离子交换柱、Macro-prep High S预装柱层析法,得到第Ⅲ峰具PLA2活性,且达到电泳纯,经NanoLCESI-MS/MS鉴定其为PLA2,分子量约为14.06kD;PLA2在0~1μg/ml的浓度下对HSC-T6细胞具有一定的促增殖作用,2μg/ml时细胞数达到最大值,4~16μg/ml时对细胞生长有抑制作用,且随浓度增大细胞数降低。结论采用Sephadex G-50、CM-Sepharose CL-6B、Macro-prep High S预装柱结合的方法对广西眼镜蛇毒进行分离纯化,得到电泳纯且具PLA2活性的磷脂酶A2;广西眼镜蛇毒PLA2对肝星状细胞HSC-T6增殖有抑制作用,PLA2对HSC-T6细胞的最小毒性浓度为2μg/ml。
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| 关 键 词： | 磷脂酶A2 分离纯化 CCK-8 肝星状细胞 |
The Separation and Purification of Guangxi Cobra venom phospholipase A2 and its effect on HSC-T6 |
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| FU Dao-ying;ZHANG Xue-rong;FU Rao;ZHANG Ke-xing;HOU Rui-xue;BAN Jian-dong;NONG Jun;CHEN Ying. The Separation and Purification of Guangxi Cobra venom phospholipase A2 and its effect on HSC-T6[J]. Journal of Snake, 2015, 0(2): 99-102 |
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| Authors: | FU Dao-ying ZHANG Xue-rong FU Rao ZHANG Ke-xing HOU Rui-xue BAN Jian-dong NONG Jun CHEN Ying |
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| Affiliation: | FU Dao-ying;ZHANG Xue-rong;FU Rao;ZHANG Ke-xing;HOU Rui-xue;BAN Jian-dong;NONG Jun;CHEN Ying;The Institute of Snake Venom Research of Guangxi Medical University; |
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