新生隐球菌转录共激活因子MBF1基因的鉴定与敲除 |
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作者姓名: | 周兆婧 孟云芳 赵静宇 桑军军 张超 法振宗 方伟 廖万清 |
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作者单位: | 上海市医学真菌分子生物学重点实验室;上海长征医院皮肤科;上海市皮肤病医院 |
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基金项目: | 国家973项目(2013CB531601);上海市自然科学基金(12ZR1454400,12JC1411000);上海市医学真菌分子生物学实验室基金(14DZ2272900) |
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摘 要: | 目的构建新生隐球菌转录共激活因子MBF1基因缺陷菌株。方法采用套叠PCR方法 ,构建含有抗性基因NEO以及靶基因上下游同源DNA片段的基因敲除框,通过基因枪将重组片段转化入新生隐球菌,应用PCR筛选和DNA序列测序方法对基因突变株进行鉴定与验证。结果成功构建了新生隐球菌基因突变株mbf1裣。结论通过基因突变株mbf1裣的构建,为深入研究新生隐球菌转录辅助因子Mbf1的功能机制奠定基础。
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关 键 词: | 新生隐球菌 致病机制 基因敲除 |
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