| 铁过载引发人肝细胞HH4 N-糖链表达差异研究 |
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| 引用本文： | 李士伟,关锋,李想. 铁过载引发人肝细胞HH4 N-糖链表达差异研究[J]. 生物学杂志, 2015, 0(3): 9-14 |
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| 作者姓名： | 李士伟 关锋 李想 |
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| 作者单位： | 江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;江南大学无锡医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学青年基金(31400691);江苏省自然科学基金(BK20140169) |
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| 摘 要： | 肝脏铁过载是血液系统疾病患者进行骨髓移植后的典型并发症之一,长期铁过载可引发肝脏细胞凋亡和器官损坏,然而铁过载的分子调控机理迄今仍不清楚。以培养的枸橼酸铁铵过载人肝细胞HH4和正常人肝细胞HH4为研究对象,细胞裂解提取总蛋白,分子筛超滤管分离获得总糖肽,PNGase F酶解释放出N-糖链,Sepharose 4B除盐纯化N-糖链,再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术比较N-糖链变化情况。同时,采用荧光细胞凝集素免疫组化方法验证糖链分析结果。结果在铁过载人肝细胞和正常细胞中均检测到16种N-糖链,但糖链丰度存在明显差异。与正常人肝细胞相比,铁过载人肝细胞中高甘露糖型糖链的含量降低,而杂合型、复杂型、平分型、岩藻糖化和唾液酸化糖链的含量明显升高。凝集素免疫组化结果显示铁过载后细胞对凝集素Con A的亲和作用减弱,而对PHA-E、AAL、LCA和MAL-II的亲和作用增强,与糖链质谱分析结果相一致。研究为进一步探索人肝细胞铁过载模式下N-糖链表达差异的分子机理提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 铁过载 人肝细胞HH4 MALDI-TOF/TOF-MS N-糖链 凝集素免疫组化 |
Study on differential expression of N-linked glycans in iron overload-induced human hepatocytes HH4 |
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| LI Shi-wei;GUAN Feng;LI Xiang. Study on differential expression of N-linked glycans in iron overload-induced human hepatocytes HH4[J]. Journal of Biology, 2015, 0(3): 9-14 |
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| Authors: | LI Shi-wei GUAN Feng LI Xiang |
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| Affiliation: | LI Shi-wei;GUAN Feng;LI Xiang;Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry & Biotechnology Ministry of Education, Jiangnan University;School of Biotechnology, Jiangnan University;Wuxi Medical School, Jiangnan University; |
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