| 在结肠癌细胞中RNA干扰TGFBR2慢病毒载体的构建及其功能的初步研究 |
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| 引用本文： | 李袁飞,赵和平,刘静,朱国强,张革红,贾军梅,杨文慧. 在结肠癌细胞中RNA干扰TGFBR2慢病毒载体的构建及其功能的初步研究[J]. 中国生物工程杂志, 2013, 33(5): 28-34 |
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| 作者姓名： | 李袁飞 赵和平 刘静 朱国强 张革红 贾军梅 杨文慧 |
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| 作者单位： | 1 山西医科大学第一医院 太原 030001 2 山西太原解放军264医院 太原 030001 |
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| 摘 要： | 目的:构建TGFBR2基因的RNA干扰慢病毒载体,为研究该基因在结肠癌细胞中的作用奠定基础.方法:合成TGFBR2基因特异性RNAi靶序列,与pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体连接,构建干扰载体并鉴定.与TGFBR2质粒共转染HEK293细胞,qRT-PCR和Western blot方法筛选最佳干扰序列,感染SW480细胞.10ng/ml TGF-β1和20ng/ml TNF-a共作用TGFBR2干扰后的SW480细胞和未干扰组细胞72h后,通过细胞侵袭试验计算细胞侵袭数目.结果:成功构建TGFBR2的RNA干扰载体,第4组序列效果最佳,感染SW480后,TGFBR2基因的mRNA表达抑制率为78.45％.TNF-a和TGF-β1处理干扰前后的SW480细胞,通过细胞侵袭试验显示各组细胞迁移的数目:干扰组为89.3±7.9,未干扰组为15.1±8.2,干扰组细胞明显多于对照组(P＜0.01).结论:成功构建人TGFBR2基因特异性的慢病毒干扰载体,并建立稳定的细胞株,为预防和干预结肠癌的早期转移奠定基础.初步提示在TGF-β1和TNF-a因子存在的炎症微环境中,TGFBR2基因突变的结肠癌细胞更具有侵袭性.
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| 关 键 词： | 结肠癌 TGFBR2基因 慢病毒载体 RNA干扰 |
| 收稿时间： | 2013-02-18 |
Construction of TGFBR2 miRNA Lentiviral Vector in Human Colon Cancer Cell Line and the Preliminary Study of Its Function |
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| LI Yuan-fei,ZHAO He-ping,LIU Jing,ZHU Guo-qiang,ZHANG Ge-hong,JIA Jun-mei,YANG Wen-hui. Construction of TGFBR2 miRNA Lentiviral Vector in Human Colon Cancer Cell Line and the Preliminary Study of Its Function[J]. China Biotechnology, 2013, 33(5): 28-34 |
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| Authors: | LI Yuan-fei ZHAO He-ping LIU Jing ZHU Guo-qiang ZHANG Ge-hong JIA Jun-mei YANG Wen-hui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Colon cancer TGFBR2 Lentiviral vector RNA interfering |
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