大肠杆菌0157噬菌体中vt2基因A、B亚单位的克隆与序列分析

根据GenBank中毒素基因vt1、vt2序列设计合成4对引物，以大肠杆菌O157菌株DNA为模板，扩增vt1、vt2，从只含有vt2的菌株中诱导释放噬菌体，以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增，获得vt2、vt2-A、vt2-B3条特异性DNA带；将vt2-A、vt2-B扩增产物纯化后，分别插入pMD18-T载体，测序结果与相应序列比较，vt2-A和vt2-B亚单位的基因序列与GenBank中编码VT2毒素的A、B亚单位的核苷酸序列(X07865，NC_002655，：BA000007，AF291819)的同源性分别为98％～99％、96％～100％，确定vt2位于噬菌体，并为进一步研究大肠杆菌O157中VT噬菌体的毒力转导、VT2毒素的表达和应用奠定基础。