毒素源性大肠杆菌K88ac抗原基因的次级克隆和重组质粒的限制图

从我国引起仔猪腹泻的野生株E. coli 79-1454克隆了K88ac抗原基因，获得了重组体E. coli RR1(pNZ8801)，分子量为10 Md。为了得到分子量更小的重组体，用E．coRI消化重组质粒，除去中间约3.2 Md的片段，得到次级克隆株E. coli RR1(pNZ8802)，质粒分子量为6.8 Md。测定其K 88ac抗原为阳性，而且其产生的K88at抗原量略高于初级克隆株。电镜照片表明重组体表面长有菌毛。萤光抗体染色和猪刷状缘细胞粘附试验亦表明有良好的粘附生物活性。此重组体可以与本人克隆的K99抗原基因构建成复合重组体。本文还作了重组体的限制性酶切图。