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| 人copine Ⅴ蛋白多克隆抗体的制备 | |
| 作者姓名： | 丁学锋 靳雁斌 王晓文 吴燕 刘淑红 宋小国 范文红 范明 |
| 摘 要： | 目的:制备兔抗人copine Ⅴ多克隆抗体.方法:将copineⅤ N端423 bp(626～1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a( ),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体.结果:表达并纯化了copine Ⅴ N端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copine Ⅴ.结论:制备了具有高亲和性和特异性的抗人copine Ⅴ多克隆抗体. |
| 关 键 词： | copine Ⅴ 原核表达 多克隆抗体 端蛋白 多克隆抗体 Human Polyclonal Antibody 抗人 内源性 特异性识别 体能 高亲和性 蛋白表达 结果 柱纯化 沉淀法 抗血清 检测 Western ELISA 家兔 免疫 混合 |
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