钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响 |
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引用本文: | 陈雪岚,汤立,焦海涛,徐峰,熊勇华.钝齿棒杆菌argR基因缺失株构建及其缺失对精氨酸生物合成途径相关基因转录水平的影响[J].微生物学报,2013,53(1):92-98. |
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作者姓名: | 陈雪岚 汤立 焦海涛 徐峰 熊勇华 |
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作者单位: | 1. 江西师范大学功能有机小分子教育部重点实验室,生命科学学院,南昌330022 2. 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,南昌,330047 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30960012,31160323) |
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摘 要: | 目的]钝齿棒杆菌AS 1.542中argR基因编码的蛋白ArgR在精氨酸生物合成途径中扮演负调控的角色,但其对相关基因在转录水平的影响还未见报道.因此,本课题组构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并在转录水平上比较野生株与缺失株精氨酸生物合成途径相关基因的变化.方法]采用无痕敲除的方法构建了钝齿棒杆菌argR基因缺失株,并采用荧光定量PCR方法分析缺失株和野生株精氨酸生物合成途径相关基因在转录水平的变化.结果]利用pK18mobsacB质粒中蔗糖致死基因sacB反向筛选标记及PCR方法成功筛选到钝齿棒杆菌argR基因缺失株;荧光定量PCR结果表明,argR基因缺失株精氨酸生物合成途径中相关基因在转录水平获得大量提高,平均约上调162.13倍.结论]钝齿棒杆菌精氨酸生物合成途径的相关基因受负调控蛋白ArgR的显著调控,但其基因的敲除并没有引起精氨酸产量发生明显的变化.
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关 键 词: | 钝齿棒杆菌 argR基因 无痕敲除技术 精氨酸 荧光定量PCR |
收稿时间: | 2012/7/19 0:00:00 |
修稿时间: | 2012/9/15 0:00:00 |
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