| 禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能 |
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| 引用本文： | 吾鲁木汗·那孜尔别克,张宇凤,龚凤娟,泽田拓士,恩特马克·布拉提白. 禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能[J]. 微生物学报, 2013, 53(1): 66-73 |
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| 作者姓名： | 吾鲁木汗·那孜尔别克 张宇凤 龚凤娟 泽田拓士 恩特马克·布拉提白 |
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| 作者单位： | 1. 吉首大学生物资源与环境科学学院,吉首,416000
2. 日本兽医生命科学大学兽医学部兽医微生物学实验室,东京 180-8602 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972206);湖南省研究生科研创新基金项目(CX2011B397) |
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| 摘 要： | [目的]探讨ompH基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用.[方法]利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29△ompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR筛选ompH基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证.用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异.[结果]组合PCR、逆转录PCR和DNA测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3△ompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3△ompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P＜0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3△ompH的致病性相对减弱.[结论]本实验构建的突变株C48-3△ompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础.
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| 关 键 词： | 禽多杀性巴氏杆菌 ompH基因 敲除突变 粘附 致病性 |
| 收稿时间： | 2012-08-28 |
| 修稿时间： | 2012-10-30 |
Construction and characterization of ompH gene knockout mutant of avian Pasteurella multocida C48-3 |
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| Wulumuhan Nazierbieke,Yufeng Zhang,Fengjuan Gong,Sawada Takuo and Entomack Borrathybay. Construction and characterization of ompH gene knockout mutant of avian Pasteurella multocida C48-3[J]. Acta microbiologica Sinica, 2013, 53(1): 66-73 |
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| Authors: | Wulumuhan Nazierbieke Yufeng Zhang Fengjuan Gong Sawada Takuo Entomack Borrathybay |
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| Affiliation: | Wulumuhan Nazierbieke1,Yufeng Zhang1,Fengjuan Gong1,Sawada Takuo2,Entomack Borrathybay1* 1 College of Biology and Environmental Sciences,Jishou University,Jishou 416000,China 2 Laboratory of Veterinary Microbiology,Nippon Veterinary and Life Science University,Tokyo 180-8602,Japan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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