微载体上依赖于整合蛋白α2亚基的细胞与细胞外基质的粘附(英文)

Ｖｅｒｏ细胞是肾上皮细胞，合成并分泌层粘连蛋白和ＩＶ型胶原，从而在细胞外形成对细胞生长、迁移等有重要影响的细胞外基质膜。已知影响细胞与细胞外基质相互作用的蛋白质分子是整合蛋白。微载体所提供的三维立体培养条件与细胞在体内的生长、迁移条件相似，为在体外研究体内类似过程提供了很好的模型。通过蛋白质印迹法可以检测到：正常培养条件下，在微载体上培养４８小时，Ｖｅｒｏ细胞表达整合蛋白α２亚基（Ｆｉｇ．１ａ）；如果同时加入层粘连蛋白，α２亚基的表达量显著提高（Ｆｉｇ．１ｂ）。正常培养条件下，培养１０天，Ｖｅｒｏ细胞在微载体上形成密集的多层生长，α２亚基表达量明显高于培养初期（Ｆｉｇ．１ｃ）。间接免疫荧光标记（Ｆｉｇ．２）和免疫电镜观察（Ｆｉｇ．３）证实：在层粘连蛋白作用下，α２亚基大量表达，并定位于细胞“附着斑”位置的细胞膜上。此时，如果再用抗层粘连蛋白抗体处理，可观察到原“附着斑”消失，α２亚基在细胞内呈散布状（Ｆｉｇ．４）。整合蛋白α２亚基的表达和与层粘连蛋白形成的“附着斑”提供了Ｖｅｒｏ细胞在微载体上附着和迁移的基础。可能，不同的细胞外基质可以通过不同的整合蛋白来调节细胞活动。