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红肉猕猴桃DFR基因的克隆及表达分析
引用本文:杨俊,姜正旺,王彦昌.红肉猕猴桃DFR基因的克隆及表达分析[J].武汉植物学研究,2010,28(6):673-681.
作者姓名:杨俊  姜正旺  王彦昌
作者单位:[1]中国科学院武汉植物园保育遗传重点实验室,武汉 430074 [2]中国科学院研究生院,北京 100049
基金项目:国家自然科学基金,武汉市青年科技晨光计划项目,中国科学院知识创新工程重要方向性项目--植物园与生物分类学研究专项
摘    要:利用葡萄(Vitis vinifera)果实的DFR-cDNA序列搜索猕猴桃(Actinidia Lindl.)EST数据库,拼接所有与该cDNA相似片段成contig并借此设计引物,分离出红肉猕猴桃(A.chinensis var.rufopulpa)中DFR的两个克隆(AcDFR1和AcDFR2)的片段。在此基础上利用5′RACE和3′RACE技术,分别克隆到具有完整阅读框的AcDFR1(1264 bp)和靠近3′端的部分AcDFR2序列(880 bp)。AcDFR1与茶DFR-cDNA(Camellia sinensis)相似达84%,且AcDFR1与非洲菊变种(Gerbera hybrida var.regina)的氨基酸序列相似达80%。据DFR聚类分析,AcDFR1与AcDFR2蛋白类型上差异显著。实时定量PCR分析表明,AcDFR1在‘金魁'(A.chinensis var.deliciosa‘Jinkui')中表达很高,AcDFR1和AcDFR2在‘金农'(A.chinensis var.chinensis‘Jinnong')与‘红阳'(A.chinensis var.chinensis‘Hongyang')中较低,且在果实发育后期(大约花后90~120 d)均有所升高,二者可能参与了红肉猕猴桃中花青素的积累,而在绿肉猕猴桃‘金魁'与黄肉猕猴桃‘金农'中,AcDFR1可能还参与了类黄酮代谢过程中的上游分支途径。

关 键 词:猕猴桃  二氢黄酮醇-4-还原酶基因  电子克隆  花青素  表达

Cloning and Expression of Dihydroflavonol 4-Reductase in Actinidia chinensis var. Rufopulpa
YANG Jun,JIANG Zheng-Wang,WANG Jun-Chang.Cloning and Expression of Dihydroflavonol 4-Reductase in Actinidia chinensis var. Rufopulpa[J].Journal of Wuhan Botanical Research,2010,28(6):673-681.
Authors:YANG Jun  JIANG Zheng-Wang  WANG Jun-Chang
Institution:1.Wuhan Botanical Garden,Chinese Academy of Sciences,Wuhan 430074,China;2.Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China)
Abstract:
Keywords:Actinidia  Dihydroflavonol 4-reductase  Cloning  Anthocyanin  Gene expression
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