固定化原生质体产谷氨酸脱氢酶的研究

本文报道了用海藻酸钙凝胶包埋法制备固定化谷氨酸捧杆菌T6—13原生质体及其用于生产谷氨酸脱氢酶(GDH，E．C．1．4．1．4)的研究。在一定条件下游离细胞和固定化细胞胞内可积累谷氨酸脱氢酶，但并不分泌到胞外。对数生长前期的细胞经蛋清溶菌酶处理14h后分离得到原生质体，游离原生质体和固定化原生质体可产胞外GDH。用3％海藻酸钙凝胶包埋10%的原生质体制备的固定化原生质体具有较高的产酶性，分批培养72h后发酵液中GDH活力可达到1．64×10^-2u／ml，为游离细胞胞内产酶的205％。固定化原生质体可用溶菌酶处理固定化细胞而制得，与直接固定化原生质体制备的固定化原生质体具有同样的产酶能力，且制备方便。固定化原生质体可重复使用6批次(约18天)，且具有良好的贮藏稳定性。