酵母与大肠杆菌穿梭定点突变载体系统的构建及应用

利用可以在大肠杆菌中形成单链又可以在大肠杆菌和酵母中穿梭的质粒BFDl9作为寡聚核苷酸介导的定点突变载体，分别在大肠杆菌和酵母中获得了预定的TRP1基因突变体，再利用这个带TRP1突变的质粒BFD25和BFDl9，建立了一个在酵母系统中进行定点突变时可以富集突变体的筛选方法。借助这种方法我们在酵母系统中完成了人表皮生长因子基因表达单元的寡聚核苷酸介导的缺失突变，此突变载体系统在酵母与大肠杆菌中都适用，而且可以直接在酵母细胞中进行突变表型的研究。