| 在BCR/ABL基因组上敲入mRNA不稳定元件可逆转K562细胞恶性转化 |
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| 引用本文： | 刘力,王树蕙.在BCR/ABL基因组上敲入mRNA不稳定元件可逆转K562细胞恶性转化[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(6):703-709. |
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| 作者姓名： | 刘力 王树蕙 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京 100005 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金(7992033)及卫生部科学研究基金(98-1-002)资助 |
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| 摘 要： | 融合基因 BCR/ABL在慢性粒细胞白血病的恶性转化过程中起着主导作用 .针对融合基因的 3′端构建了一个定点基因打靶质粒 ,p F2 .neo.abl(1 - 4) ,将一段可引发核内 RNA降解的元件 ,URE,定点整合到融合基因 poly(A)位点的上游 .打靶质粒经脂质体转染 K562细胞后 ,在 96孔板上进行 40 0 μg/ml G41 8筛选 ,neor克隆进一步在 2 4孔板上扩增 .以特异性引物经基因组 PCR及Southern印迹分析对阳性克隆进行检测 .研究发现阳性克隆在 96孔板内 3周其增殖状况良好 ,但在 2 4孔板内扩增一周后迅速发生死亡现象 .观察单个阳性克隆在正常培养液增殖情况 ,发现 5d后其细胞周期被完全阻抑 .研究结果说明 ,在转录后期 m RNA水平控制 BCR/ABL融合基因的表达可以抑制慢性粒细胞白血病的恶性转化 .
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| 关 键 词： | 慢性粒细胞白血病 费城染色体 RNA降解 基因打靶 |
| 收稿时间： | 2000-12-20 |
| 修稿时间： | 2000年6月2日 |
Reversing Malignant Transformation of K562 Cells by Knock in an RNA Destabilizing Element into BCR/ABL Genome * |
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| LIU Li,WANG Shu hui.Reversing Malignant Transformation of K562 Cells by Knock in an RNA Destabilizing Element into BCR/ABL Genome *[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2000,16(6):703-709. |
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| Authors: | LIU Li WANG Shu hui |
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| Institution: | (National Laboratory of Medical Molecular Biology,Institute of Basic Medical Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College,Beijing 100005,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chronic myelogenous leukemia Philadelphia chromosome RNA degradation Gene targeting |
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