摘 要: | 本文发现PHO81蛋白上的碱性区(88-160)和酸性区(771-810)附近的微小变化可导致rAPase的表达向组成型转化,且这两个区域是协同作用的,而酸性区的净负电荷的降低能使rAPase的活力降低。PHO81蛋白中有6个锚蛋白重复单位(ankyrinrepeats),是PHO81蛋白与PHO80-PHO85蛋白复合物的结合区。对锚蛋白重复序列的突变表明锚蛋白重复序序列1,2,4,5,6对PHO81是十分关键的,而锚蛋白重复序列3的Pro509,Leu510的缺失并不影响PHO81的功能。在PHO81蛋白的701-719位氨基酸残基有一段类似核定位序列的肽段,相应基因片段的缺失导致PH081完全失活。但将该可能的核定位序列的最保守的碱性氨基酸Arg701、Lys702同时变为中性氨基酸(Ser,Gin)导致rAPase的表达大大提高,而将核定位序列中Lys717变为Asn,或将Arg719变为Ser,都不影响PHO81的功能。
|