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| 斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF146基因的克隆、表达与启动子活性分析 | |
| 引用本文： | 盛晔,闵丹,李轶女,张志芳,朱越雄,朱江.斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF146基因的克隆、表达与启动子活性分析[J].微生物学报,2010,50(12):1600-1606. |
| 作者姓名： | 盛晔 闵丹 李轶女 张志芳 朱越雄 朱江 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,苏州,215123;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 3. 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,苏州,215123 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（30770279）苏州市科技支撑计划项目(SNG0924) |
| 摘 要： | 【目的】研究斜纹夜蛾核型多角体病毒II ORF146基因的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV IIORF146基因序列设计引物,经PCR扩增克隆ORF146基因。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF146片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,读码框含1383 bp,编码460个氨基酸的蛋白质,推定分子量为50.4 kDa。启动子活性分析和转录时相分析都表明该基因是个早、晚期都表达的基因,在病毒感染8 h和18 h有两个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但趋于稳定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1∶3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF146基因是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。推测ORF146基因可能与SpltMNPV II病毒感染宿主细胞后病毒DNA复制有关。制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。 |
| 关 键 词： | 关键词: 斜纹夜蛾 核型多角体病毒 ORF146基因 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2010/7/21 0:00:00 |
Cloning and expression of ORF146 gene of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus II (SpltMNPVII) |
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| Ye Sheng,Dan Min,Yinü Li,Zhifang Zhang,Yuexiong Zhu,Jiang Zhu.Cloning and expression of ORF146 gene of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus II (SpltMNPVII)[J].Acta Microbiologica Sinica,2010,50(12):1600-1606. | |
| Authors: | Ye Sheng Dan Min Yinü Li Zhifang Zhang Yuexiong Zhu Jiang Zhu |
| Abstract: | |
| Keywords: | Key words: Virus Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus ORF146 gene expression polyclonal antibody |
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