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白灵侧耳漆酶分离纯化及其酶学性质研究
引用本文:杨娟,邹亚杰,张瑞颖,胡清秀. 白灵侧耳漆酶分离纯化及其酶学性质研究[J]. 菌物学报, 2015, 34(3): 456-464
作者姓名:杨娟  邹亚杰  张瑞颖  胡清秀
作者单位:中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 北京100081
摘    要:为了探索白灵侧耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性质,以白灵侧耳菌株00485为试验材料,从发酵液中分离纯化得到胞外漆酶并对其酶学性质进行测定。纯化流程依次为DEAE-Cellulose阴离子交换层析,CM-Cellulose阳离子交换层析,SP-Sepharose强阳离子交换层析以及Superdex 75凝胶过滤层析,获得胞外白灵侧耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE检测结果表明Pn Lac为65k Da的单一蛋白。Pn Lac经过胰蛋白酶水解得到3种肽段,经过NBCI-BLAST后发现它们与糙皮侧耳、环柄韧伞、刺芹侧耳等的漆酶具有同源性。底物为2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)时该种漆酶的最适反应温度和p H分别为50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能够抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能够提高它的活性,米氏常数Km和Vmax分别是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。

关 键 词:白灵侧耳  漆酶  分离纯化  酶活

Purification and property of laccase from Pleurotus eryngii var.tuoliensis
YANG Juan,ZOU Ya-Jie,ZHANG Rui-Ying,HU Qing-Xiu. Purification and property of laccase from Pleurotus eryngii var.tuoliensis[J]. Mycosystema, 2015, 34(3): 456-464
Authors:YANG Juan  ZOU Ya-Jie  ZHANG Rui-Ying  HU Qing-Xiu
Abstract:
Keywords:Pleurotus eryngii var.tuoliensis  laccase  isolation and purification  enzyme activity
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