摘 要: | 按照交替氧化酶(alternative oxidase,AOX)位于线粒体内膜外侧亲水区S螺旋的氨基酸序列,用固相法合成由12个氨基酸残基组成的多肽,将此多肽与α-牛胰凝乳蛋白酶原A相连,用作半抗原,免疫家兔制备人工合成12肽的抗体.将此抗体与来自绿豆幼苗不同器官线粒体的总蛋白分别进行Western杂交,可观察到绿豆幼苗线粒体中具有两条清晰的AOX杂交带,它们的分子量分别为35和38 ku.同时,取绿豆幼苗的子叶、真叶和下胚轴,分别测定和计算它们的呼吸参数,可以得知真叶器官组织具有最大的总呼吸(Vt)、交替途径容量(Valt)及交替途径实际运行量(ρValt);其次是子叶的Vt和ρValt;下胚轴的Vt和ρValt最低,但是Valt却高于子叶.绿豆幼苗不同器官的有关呼吸参数测定结果与AOX表达的Western分析基本一致:真叶的Vt特别是ρValt最高,也具有35和38 ku的AOX的杂交多肽; 其次是子叶的Vt和ρValt,且在子叶中,只见一条分子量为38 ku的AOX多肽;下胚轴的Valt和ρValt都最低,Western杂交显示只有一条分子量为38ku的多肽,而且表达量较少.35 ku的AOX可能对真叶的ρValt作出了主要贡献.
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