| 高效液相色谱法测定红树林放线菌DNA的[G+C)mol%含量 |
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| 引用本文： | 曲直,洪葵.高效液相色谱法测定红树林放线菌DNA的[G+C)mol%含量[J].生物技术通报,2009(Z1). |
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| 作者姓名： | 曲直 洪葵 |
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| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院生物技术研究所,海口,571101;海南大学食品学院,儋州,571737
2. 中国热带农业科学院生物技术研究所,海口,571101 |
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| 基金项目： | 国家863海洋生物资源开发利用技，国家自然科学基金重点项目-广东联合基金 |
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| 摘 要： | 应用高效液相色谱法测定了放线菌的(G+C)mol%,并就有关分析条件和DNA水解条件进行了优化选择.以Escherichia.coli DH5α作为标准菌株,实验室分离鉴定的8株红树林放线菌作为待测菌株,采用流动相为20 mmol/L KH2PO4缓冲液(pH 5.6)∶甲醇(体积比90∶10),检测波长为260 nm,硫速为1 ml/min,柱温为35℃,分析时间15 min对4种碱基进行分离.结果表明:标准碱基溶液的pH值、流动相的组成和pH值是影响各碱基色谱峰分离和峰形的主要因素.在优化选择的条件下测定,DNA碱基分离效果好,无杂峰干扰,以峰面积计算得到标准菌株Escherichia coli DH5 α的(G+C)mol%为54.9694%与已经报道的差异不显著;待测菌株的(G+C)mol%均在菌株所在科或属下的(G+C)mol%围内;采用酸水解放线菌的DNA可缩短鉴定时间,步骤简明.实验结果充分显示高效液相色谱法测定放线菌(G+C)mol%快速、准确、结果稳定,是放线菌分类鉴定的一种可靠方法.
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| 关 键 词： | 高效液相色谱 (G+C)mol％ 分类鉴定 |
The Identification of the G+C Content of DNA by HighPerformance Liquid Chromatography for Mangrove Actinomycetes |
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| Qu Zhi,Hong Kui.The Identification of the G+C Content of DNA by HighPerformance Liquid Chromatography for Mangrove Actinomycetes[J].Biotechnology Bulletin,2009(Z1). |
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| Authors: | Qu Zhi Hong Kui |
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