| 马立克氏病病毒pp38基因产物对其上游双向启动子活性的增强作用 |
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| 引用本文： | 丁家波,崔治中,姜世金,Sanjay Reddy.马立克氏病病毒pp38基因产物对其上游双向启动子活性的增强作用[J].中国科学C辑,2005,35(6):519-526. |
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| 作者姓名： | 丁家波 崔治中 姜世金 Sanjay Reddy |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. Texas A&M University, College Station, TX, 77843, USA |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(批准号：30300450)，国家自然科学基金(批准号：30070544)资助 |
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| 摘 要： | 为了研究鸡马立克氏病病毒(MDV)pp38基因和1.8 kb mRNA转录子基因间一双向启动子的活性, 本研究以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因, 构建了启动子以pp38方向转录的重组质粒pP(pp38)-EGFP和以1.8 kb方向转录的重组质粒pP(1.8-kb)-EGFP. 将这二个重组质粒分别转染鸡胚成纤维细胞(CEF)、MDV rMd5克隆株感染的CEF(rMd5-CEF)以及pp38基因缺失的MDV rMd5Δpp38克隆株感染的CEF(rMd5Δpp38-CEF), 结果只有在转染rMD5-CEF样品中才能检测到EGFP的表达; 将上述二个EGFP重组质粒分别与能表达pp38的重组质粒pcDNA-pp38共转染CEF和rMd5Δpp38-CEF, 在CEF中仍检测不到EGFP的表达, 而在rMd5Δpp38-CEF形成的空斑周围, 能检测到EGFP的表达. 结果提示pp38是该双向启动子发挥作用的必要条件, 但该启动子活性的发挥仍需除pp38以外的其他因子的共同作用. 将pcDNA-pp38质粒和pp24表达质粒pcDNA-pp24, 以及EGFP表达质粒共转染无MDV感染的CEF时, 能检测到EGFP的表达. 核酸阻滞试验表明, pp38必须和pp24共表达时, 才能和启动子结合, 表现出阻滞现象. 说明pp38和pp24可能以聚合体形式与启动子结合并增强启动子的转录活性. 还证明了该双向启动子在1.8 kb mRNA转录子方向的启动活性显著高于pp38基因方向.
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| 关 键 词： | pp38基因 kb mRNA转录子 双向启动子 马立克氏病病毒 |
| 收稿时间： | 2005-06-01 |
| 修稿时间： | 2005年6月1日 |
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