牛λ3干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性检测 |
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作者姓名: | 赵璐璐 赵泽 杨鑫 刘兴健 胡小元 张志芳 李轶女 |
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作者单位: | 1.中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081;2.中国农业科学院蚕业研究所, 江苏 镇江 212018 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2016YFD0500108;2017YFD0500706);国家自然科学基金项目(31670156)资助 |
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摘 要: | 牛λ3干扰素(BoIFN-λ3)是一种新型干扰素,可应用于牛传染性疾病的防治。在家蚕杆状病毒表达系统中可实现BoIFN-λ3的高效表达。首先在优化合成的BoIFNλ3基因起始密码子上游引入Kozak序列,将其克隆至转移载体pVL1393,获得pVL1393-BoIFN-λ3重组质粒。利用本实验室构建的家蚕杆状病毒表达系统,获得整合BoIFN-λ3基因的重组家蚕杆状病毒,将重组病毒感染五龄起蚕,在蚕血淋巴中得到表达产物BoIFN-λ3。采用微量细胞病变抑制法在MDBK/VSV*GFP 系统检测蚕体中表达BoIFN-λ3的效价可达(2.7±0.12)×105 U/mL,利用空斑筛选法筛选重组病毒,测得最高表达量的重组病毒表达的BoIFN-λ3的效价可达(8.1±0.52)×105 U/mL,表达量提高3倍。家蚕杆状病毒表达系统为优质高效的牛λ3干扰素产品的生产提供了一种新方法。
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关 键 词: | 牛λ3干扰素 家蚕杆状病毒表达系统 抗病毒活性检测 |
收稿时间: | 2018-04-25 |
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