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猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定
引用本文:王先炜,姜平,李玉峰,蒋文明,汤景元.猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白重组腺病毒的构建与鉴定[J].中国病毒学,2006,21(1):29-33.
作者姓名:王先炜  姜平  李玉峰  蒋文明  汤景元
作者单位:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
基金项目:浙江省科技攻关项目;中国科学院资助项目;江苏省高新技术项目;中南大学校科研和教改项目;教育部跨世纪优秀人才培养计划
摘    要:猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因.本研究利用PCR技术将Cap蛋白基因克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-Cap,测定其TCID50为1013 7/mL.用RT-PCR、间接ELISA、Western blot和IPMA等方法证明了Cap蛋白在腺病毒中获得表达.该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础.

关 键 词:Ⅱ型猪圆环病毒  Cap蛋白  重组  腺病毒  构建
文章编号:1003-5153(2006)01-0029-05
修稿时间:2005年6月8日

Construction and Identification of Recombinant Adenoviruses Containing the Cap Protein of Porcine Circovirus 2
WANG Xian-wei,JIANG Ping,LI Yu-feng,JIANG Wen-ming,TANG Jing-yuan.Construction and Identification of Recombinant Adenoviruses Containing the Cap Protein of Porcine Circovirus 2[J].Virologica Sinica,2006,21(1):29-33.
Authors:WANG Xian-wei  JIANG Ping  LI Yu-feng  JIANG Wen-ming  TANG Jing-yuan
Abstract:
Keywords:
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