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| 表达HIV-I CN54株gagpol基因重组痘苗病毒疫苗株的构建 | |
| 引用本文： | 戴凯凡,刘颖,周小云,王芙,段丹丽,吴岚,赵斌,邵一鸣. 表达HIV-I CN54株gagpol基因重组痘苗病毒疫苗株的构建[J]. 中国病毒学, 2003, 18(5): 441-445 |
| 作者姓名： | 戴凯凡 刘颖 周小云 王芙 段丹丽 吴岚 赵斌 邵一鸣 |
| 作者单位： | 1. 中国艾滋病预防和控制中心,北京,100050;华中农业大学生命科学技术学院,农业微生物国家重点实验室,湖北武汉,430070 2. 中国艾滋病预防和控制中心,北京,100050 3. 华中农业大学生命科学技术学院,农业微生物国家重点实验室,湖北武汉,430070 |
| 基金项目： | 国家863高新技术发展项目(2001AA21503) |
| 摘 要： | 为研制不带筛选标记的HIV活载体疫苗,首先构建含有neo基因和lacZ基因双重筛选标记的pVI75转移质粒,并将HIV-I中国主要流行株B'/C重组株CN54 gagpol基因置于pVI75的启动子pE/L下,构建重组质粒pVI75-Gagpol.重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染鸡胚细胞.前三轮通过G418加压,噬斑纯化,得到既含目的基因又含筛选标记的蓝色重组痘苗病毒;后三轮在无G418选择压力下,筛选只含目的基因而缺失了筛选标记的白色重组痘苗病毒.结果表明筛选到了一株重组病毒,经PCR和Dot blot检测确认该株重组痘苗病毒的neo基因和lacZ基因已丢失;PCR鉴定表明目的基因已插入重组痘苗病毒中;抗体染色和Western blot结果证实该重组病毒能很好地表达目的蛋白. |
| 关 键 词： | 人免疫缺陷病毒(HIV)I型 gagpol基因 重组痘苗病毒 疫苗株 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)05-0441-05 |
| 修稿时间： | 2003-04-28 |
Construction of Recombinant Vaccinia Virus for Expressing gagpol Gene of Chinese Epidemic HIV-I Strain (CN54, clade B'/C) |
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