家兔胚胎细胞核移植的研究(英文)

本研究以兔为实验材料，对细胞核移植过程中显微操作、电融合、电活化以及移核胚的培养等基本问题进行了研究。对兔进行ＰＭＳＧｈＣＧ超数排卵，收集成熟卵母细胞和１６细胞胚；后者经胰蛋白酶消化，去除胶膜和透明带，在不含Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的分离液中分成单个卵裂球；然后，分别对两者做ＣＢ预处理；首次尝试采用Ｗｉｌａｄｓｅｎ法，去除卵母细胞核、并将单个卵裂球注入透明带，同时、与ＭｃＧｒａｔｈＳｏｌｔｅｒ法进行比较；通过电融合使供体核进入去核的卵母细胞内；将所得移核胚在体外或在中间受体内培养并观察。结果表明：一、Ｗｉｌａｄｓｅｎ法与ＭｃＧｒａｔｈＳｏｌｔｅｒ法比较，核移植操作的成功率及以后的电融合率均无明显差异（Ｔａｂ．１）。相对于后者，Ｗｉｌａｄｓｅｎ法更简便、易于掌握并提高去核率。二、ｈＣＧ超排注射后１３～１５ｈ，观察卵母细胞发现：其中，６７８％保留有第一极体。此时的卵子若去除１／３胞质量，去核率可以达到５８３％。若推迟去核时间，笫一极体退化，失去去核标志。三、比较不同电脉冲条件，发现强度为０６３ｋｖ／ｃｍ，持续１６０μｓ的一次电脉冲可获较高移核胚的融合率（７０．８％）（Ｔａｂ．２）；并可使６１１％的成熟

Studies on Nuclear Transplantation in Rabbit Embryos