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酒类酒球菌mleP基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达
引用本文:蒋思欣,刘延琳,何秀萍,郭雪娜,张博润.酒类酒球菌mleP基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达[J].微生物学报,2004,44(4):465-468.
作者姓名:蒋思欣  刘延琳  何秀萍  郭雪娜  张博润
作者单位:1. 中国科学院微生物研究所,北京,100080
2. 西北农林科技大学葡萄酒学院,杨凌,712100
摘    要:苹果酸通透酶具有协助苹果酸 乳酸发酵 (MLF)的重要功能。以酒类酒球菌 (Oenococcusoeni)优良菌系Oenococcus Lee SD 2a的总DNA为模板 ,用PCR方法克隆到苹果酸通透酶基因mleP ,构建了重组质粒pBMmleP。序列分析表明克隆到的基因序列与已报道的序列同源性为 99%。为使目的基因在酿酒酵母中表达 ,以大肠杆菌 酿酒酵母穿梭质粒YEp35 2为载体 ,以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件 ,构建了重组表达质粒YEpmleP ,并转化酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)YS5 8。酵母转化子用含有亮氨酸、组氨酸和色氨酸的YNB平板筛选鉴定。获得的转化子在添加了L 苹果酸 (5g L)的培养基中培养 4d ;取培养液上清用HPLC检测 ,结果显示重组转化子YSP的培养液中L 苹果酸剩余含量均低于空载体转化子YS35 2 ,因此所得酵母重组转化子对苹果酸的转运能力有所提高

关 键 词:酒类酒球菌  苹果酸通透酶基因  克隆与表达  酿酒酵母
文章编号:0001-6209(2004)04-0465-04
修稿时间:2003年10月30

Cloning of mleP Gene from Oenococcus oeni and Expression in Saccharomyces cerevisiae
JIANG Si Xin,LIU Yan Lin,HE Xiu Ping,GUO Xue Na,ZHANG Bo Run.Cloning of mleP Gene from Oenococcus oeni and Expression in Saccharomyces cerevisiae[J].Acta Microbiologica Sinica,2004,44(4):465-468.
Authors:JIANG Si Xin  LIU Yan Lin  HE Xiu Ping  GUO Xue Na  ZHANG Bo Run
Institution:JIANG Si Xin 1 LIU Yan Lin 2 HE Xiu Ping 1 GUO Xue Na 1 ZHANG Bo Run 1*
Abstract:
Keywords:Oenococcus oeni    mleP gene  Cloning and expression    Saccharomyces cerevisiae
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