| 基于DOE设计和氨基酸补加策略提高CHO细胞表达抗CD20单克隆抗体* |
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| 引用本文： | 孔建涛,庄英萍,郭美锦.基于DOE设计和氨基酸补加策略提高CHO细胞表达抗CD20单克隆抗体*[J].中国生物工程杂志,2021,40(12):41-48. |
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| 作者姓名： | 孔建涛 庄英萍 郭美锦 |
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| 作者单位： | 1华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室 上海 2002372上海生物制造技术协同创新中心 上海 200237 |
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| 基金项目： | * 国家高新技术研发计划资助项目(2012AA021201) |
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| 摘 要： | 中国仓鼠卵巢细胞(CHO)流加培养生产单克隆抗体是目前主流培养方式,其中环境参数(pH和温度)和营养成分均影响细胞生长、碳氮源代谢和外源蛋白表达,是培养过程中关键的控制参数。采用实验设计(design of experiment,DOE)方法研究培养参数(温度、pH)对CHO细胞生长和抗CD20抗体表达的影响,建立营养限制型氨基酸流加策略,实现抗CD20抗体的高表达。结果表明,温度是影响蛋白质表达的显著因素,35℃有助于提高细胞密度和目标抗CD20抗体表达,而pH对抗CD20表达影响不显著,且温度和pH无交互作用,经DOE预测分析最佳培养条件是温度35℃和pH7.0。在该最佳培养条件下,在培养后期酪氨酸和半胱氨酸的浓度都低于0.1mmol/L。在培养的第2天通过补加1.5mmol/L酪氨酸和1mmol/L半胱氨酸避免营养限制,抗CD20抗体表达水平提高了24.1%,且对蛋白糖型无影响。
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| 关 键 词： | 中国仓鼠卵巢细胞 抗CD20单克隆抗体 实验设计 环境参数 流加策略 |
| 收稿时间： | 2020-09-06 |
Enhancement of Anti-CD20 Monoclonal Antibody Expression by CHO based on DOE and Amino Acid Supplemental Strategy |
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| KONG Jian-tao,ZHUANG Ying-ping,GUO Mei-jin.Enhancement of Anti-CD20 Monoclonal Antibody Expression by CHO based on DOE and Amino Acid Supplemental Strategy[J].China Biotechnology,2021,40(12):41-48. |
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| Authors: | KONG Jian-tao ZHUANG Ying-ping GUO Mei-jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chinese hamster ovary cells Anti-CD20 antibody Design of experiment Environmental parameter Fed-batch strategy |
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