| 香格里拉水韭磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)的克隆及其表达载体构建 |
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| 引用本文： | 鲁维维,刘星.香格里拉水韭磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)的克隆及其表达载体构建[J].植物科学学报,2021,38(6):812-819. |
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| 作者姓名： | 鲁维维 刘星 |
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| 作者单位： | 1. 武汉大学生命科学学院植物系统学与进化生物学实验室, 武汉 430072;
2. 西藏大学理学院, 拉萨 850000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31860046）；2019年中央财政支持地方高校改革发展专项资金项目（藏财教指〔2019〕01）。 |
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| 摘 要： | 以中国特有植物香格里拉水韭（Isoetes shangrilaensis X.Liu）为材料，通过转录组测序数据分析筛选出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（IsPEPC），根据该基因序列，从香格里拉水韭cDNA中克隆获得磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPCase）的编码基因IsPEPC，并将此基因插入pCAMBIA-2300-N-eGFP及pMD质粒载体上，再采用农杆菌介导的花序浸染法将2个重组载体分开转入野生型拟南芥（Arabidopsis thaliana（L.）Heynh.）中。结果显示：IsPEPC基因蛋白编码序列长度为2928 bp，编码975个氨基酸；同源性检索分析结果表明，该蛋白与其近源物种江南卷柏（Selaginella moellendorffii Hieron.）的PEPC基因蛋白序列同源性为79.8%。对转基因的T1代拟南芥通过抗性筛选并在gDNA水平上阳性鉴定，初步鉴定得到pC2300-N-eGFP-IsPEPC转基因株系26个和pMD-IsPEPC转基因株系32个。
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| 关 键 词： | 香格里拉水韭 CAM代谢 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因 拟南芥 载体构建 遗传转化 |
Cloning of the phosphoenolpyruvate carboxylase gene (PEPC) from Isoetes shangrilaensis X. Liu and construction of its expression vector |
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| Lu Wei-Wei,Liu Xing.Cloning of the phosphoenolpyruvate carboxylase gene (PEPC) from Isoetes shangrilaensis X. Liu and construction of its expression vector[J].Plant Science Journal,2021,38(6):812-819. |
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| Authors: | Lu Wei-Wei Liu Xing |
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| Institution: | 1. Laboratory of Plant Systematics and Evolutionary Biology, College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China;
2. School of Science, Tibet University, Lhasa 850000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Isoetes shangrilaensis Crassulacean acid metabolism Phosphoenolpyruvate carboxylase gene Arabidopsis thaliana Vector construction Genetic transformation |
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