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土壤中脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及脂肪酶基因的克隆
引用本文:玄国营,陈芳,李予霞,高剑峰.土壤中脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及脂肪酶基因的克隆[J].生物技术通报,2009(8).
作者姓名:玄国营  陈芳  李予霞  高剑峰
作者单位:石河子大学生命科学学院,石河子,832003
摘    要:以橄榄油为惟一碳源进行富集培养、以罗丹明B为指示剂的平板进行初筛,摇瓶复筛得到产脂肪酶菌株;利用滴定法、平板扩散法以及转酯反应试验,最终筛选出具有较高转酯活性脂肪酶的菌株B2.通过对B2进行形态学观察,生理生化测定以及16S rDNA特征片段比较分析,初步确定B2为克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.).通过特定引物PCR扩增得到B2菌株两个脂肪酶基因K1和K2.利用丙酮法和(NH)2SO4沉降法得到B2菌株体内的胞内酶,以叔丁醇为溶剂,催化棉籽油与甲醇反应,经过薄层层析和高效液相检测产物为生物柴油.

关 键 词:生物柴油  克雷伯氏菌  脂肪酶  脂肪酶基因

The Screening, Identification and Lipase Gene Cloning of Soil Lipase Producing Strain
Xuan Guoying,Chen Fang,Li Yuxia,Gao Jianfeng.The Screening, Identification and Lipase Gene Cloning of Soil Lipase Producing Strain[J].Biotechnology Bulletin,2009(8).
Authors:Xuan Guoying  Chen Fang  Li Yuxia  Gao Jianfeng
Abstract:
Keywords:
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