磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记 |
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引用本文: | 朱亮,蔡月琴,屠珏,应华忠,徐剑钦,陈民利.磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记[J].中国实验动物学杂志,2010(6):29-34. |
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作者姓名: | 朱亮 蔡月琴 屠珏 应华忠 徐剑钦 陈民利 |
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作者单位: | 浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心,杭州310053 |
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基金项目: | 浙江省科技厅实验动物公共服务平台项目(2008F80024) |
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摘 要: | 目的直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记。方法应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200~1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞E.coli DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库。然后用PCR法进行筛选。结果从约2000个转化子中获得240个阳性克隆。对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对。结论经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记。本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具。
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关 键 词: | 豚鼠 磁珠富集法 微卫星 |
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