| 内江猪IL-18基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 张丽,郭万柱,李晓琪,黄亚平,李雯.内江猪IL-18基因的克隆及原核表达[J].现代生物医学进展,2007,7(7):989-992. |
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| 作者姓名： | 张丽 郭万柱 李晓琪 黄亚平 李雯 |
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| 作者单位： | 四川农业大学,动物生物技术中心,四川,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划);教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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| 摘 要： | 以ConA刺激的内江猪外周血单核淋巴细胞(PBMC)为模板,采用RT-PCR技术扩增出猪IL-18全长基因,克隆其成熟蛋白的编码基因(471bp)至pMD18-T克隆载体,经双酶切和测序获得阳性克隆。通过EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切及连接反应,构建了pET-32a( )-IL-18原核表达质粒。经双酶切和DNA测序证实重组质粒构建正确,将阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE,Western-blot证实表达出35kD左右的融合蛋白。经实验确定重组内江猪IL-18蛋白诱导表达的最佳条件为IPTG 0.2mmol/L,30℃诱导培养5h。在最佳表达条件下,pIL-18的相对含量为59.6%。内江猪IL-18的原核表达为重组IL-18的纯化及其生物学功能的进一步研究提供了基础。
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| 关 键 词： | 内江猪 白细胞介素18 原核表达 |
| 文章编号： | 1673-6273（2007）07-0989-04 |
| 修稿时间： | 2007-03-082007-03-31 |
Study on Cloning and Prokaryotic Expression of Interleukin-18 Gene of Neijiang Swine |
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| ZHANG Li,GUO Wan-zhu,LI Xiao-qi,HUAN Ya-ping,LI Wen.Study on Cloning and Prokaryotic Expression of Interleukin-18 Gene of Neijiang Swine[J].Progress in Modern Biomedicine,2007,7(7):989-992. |
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| Authors: | ZHANG Li GUO Wan-zhu LI Xiao-qi HUAN Ya-ping LI Wen |
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| Institution: | Animal Biology Technology Center, Sichuan Agricultural University, Yaan 625014, Sichuan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Neijiang swine Interleukin-18 gene Prokaryotic expression |
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