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RNA干扰技术抑制BAG-1在大鼠肺泡巨噬细胞表达及恢复GR抗炎效应的研究
引用本文:张方,施毅,李子玲,钱桂生,罗向东,赵明,宋勇. RNA干扰技术抑制BAG-1在大鼠肺泡巨噬细胞表达及恢复GR抗炎效应的研究[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志, 2007, 16(3): 264-269
作者姓名:张方  施毅  李子玲  钱桂生  罗向东  赵明  宋勇
作者单位:1. 南京军区南京总医院呼吸内科,南京,210002
2. 第三军医大学新桥医院呼吸研究所,重庆,400037
3. 第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆,400037
摘    要:目的利用RNA干扰技术,建立脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1基因阻断模型,并阐明BAG-1表达对糖皮质激素受体(GR)抗炎活性的影响。方法构建两个针对BAG-1的RNAi质粒表达载体,分别命名为SiBAG-1α和SiBAG-1β,经测序确认后,转染大鼠肺泡巨噬细胞。细胞免疫组织化学法检测细胞核中BAG-1表达变化;电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测GR活性变化。结果经测序证实:成功构建两个针对BAG-1基因的RNAi(RNA干扰)质粒表达载体SiBAG-1α和SiBAG-1β;转染质粒SiBAG-1α可明显降低胞核内BAG-1蛋白表达(P<0.05),而转染质粒SiBAG-1β对胞核内BAG-1蛋白表达无明显影响;质粒SiBAG-1α转染组细胞GR活性明显明显增强(P<0.05)。结论成功地构建并筛选出一个特异而高效地阻断BAG-1表达的质粒表达载体SiBAG-1α,抑制BAG-1表达可恢复GR抗炎活性,逆转GR活性下降所致的糖皮质激素抵抗。

关 键 词:糖皮质激素受体  肺泡巨噬细胞  RNA干扰
修稿时间:2006-09-13

INVESTIGATION OF REPRESSING BAG-1 EXPRESSION IN RAT ALVEOLAR MACROPHAGE WITH RNA INTERFERENCE TECHNIQUE AND RECOVERING ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF GLUCOCORTICOID RECEPTOR
Zhang Fang,Shi Yi,Li Ziling,Qian Guisheng,Luo Xiangdong,Zhao Ming,Song Yong. INVESTIGATION OF REPRESSING BAG-1 EXPRESSION IN RAT ALVEOLAR MACROPHAGE WITH RNA INTERFERENCE TECHNIQUE AND RECOVERING ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF GLUCOCORTICOID RECEPTOR[J]. Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry, 2007, 16(3): 264-269
Authors:Zhang Fang  Shi Yi  Li Ziling  Qian Guisheng  Luo Xiangdong  Zhao Ming  Song Yong
Affiliation:Department of Respiratory Diseases, Nanjing Genaral Hospital of Nanjing Military Command, PLA, Nanjing, 210002, China; 1.Insititute of Respiratory Diseases, Xinqiao Hospital; 2.Burn Insititute , Xinan Hospital, The Third Military Medical Univisity , Chongqing 400037, China
Abstract:
Keywords:BAG-1
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