| 微杆菌属ZZJ4-1菌株的耐热尿酸氧化酶基因的克隆及重组酶性质 |
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| 引用本文： | 张鹏程,卢向锋,李倩延,林小清,刘辉,马晓航. 微杆菌属ZZJ4-1菌株的耐热尿酸氧化酶基因的克隆及重组酶性质[J]. 生物工程学报, 2012, 28(7): 813-822 |
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| 作者姓名： | 张鹏程 卢向锋 李倩延 林小清 刘辉 马晓航 |
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| 作者单位： | 浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058;浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058;浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058;浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058;浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058;浙江大学生命科学学院，浙江 杭州 310058 |
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| 摘 要： | 为了研究微杆菌Microbacterium sp.ZZJ4-1菌株的耐热尿酸氧化酶(Uox)的性质,克隆其基因(uox),得到1个894 bp的开放阅读框。该基因与多数已报道的uox无明显同源性,仅与球形节杆菌Arthrobacterglobiformis的uox有72%的同源性。将基因插入质粒pET-15b构成pET-15b-uox表达载体,转化至Escherichiacoli BL21(DE3)中诱导表达。对重组Uox的主要理化性质研究表明:该酶由大小约为35 kDa的亚基组成;其最佳反应温度和pH分别为30℃和7.5;在65℃以下和pH 8.5～11.0范围内稳定;以尿酸为底物的Km值为0.22 mmol/L;Ag+、Zn2+、Cu2+和SDS均能完全抑制酶活,Tween 20、Tween 80和Triton X-100对酶活有一定的促进作用。该重组酶的耐热性是目前报道的重组Uox中最好的,这一特性有利于其在诊断治疗中的开发应用。
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| 关 键 词： | 重组尿酸氧化酶 克隆 序列分析 微杆菌 热稳定性 |
| 收稿时间： | 2011-12-01 |
Cloning and characterization of a thermostable urate oxidase from Microbacterium sp. strain ZZJ4-1 |
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| Pengcheng Zhang,Xiangfeng Lu,Qianyan Li,Xiaoqing Lin,Hui Liu and Xiaohang Ma. Cloning and characterization of a thermostable urate oxidase from Microbacterium sp. strain ZZJ4-1[J]. Chinese journal of biotechnology, 2012, 28(7): 813-822 |
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| Authors: | Pengcheng Zhang Xiangfeng Lu Qianyan Li Xiaoqing Lin Hui Liu Xiaohang Ma |
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| Affiliation: | College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China;College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China;College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China;College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China;College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China;College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant urate oxidase cloning sequence analysis Microbacterium sp. thermal stability |
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