| 组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建 |
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| 引用本文： | 代蓉,沈思军,甘尚权,毛青青,万鹏程,郭洪,孟庆勇,刘守仁.组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建[J].中国科学:生命科学,2011,41(4):289-295. |
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| 作者姓名： | 代蓉 沈思军 甘尚权 毛青青 万鹏程 郭洪 孟庆勇 刘守仁 |
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| 作者单位： | 石河子大学动物科技学院;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物科技学院;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号:31001002); 国家转基因生物新品种培育科技重大专项(批准号:2008ZX08008-001,2009ZX08008-001B)资助项目 |
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| 摘 要： | RNAi是一种行之有效的基因沉默的新方法,被广泛地应用于基因功能的研究、疾病的治疗以及新型疫苗的研制等领域.本研究通过原核显微注射干扰载体的方法制备转基因小鼠.选用皮肤组织特异表达的人源角蛋白14（K14）基因启动子（2000bp）作为表达载体启动子,成功地驱动融合表达载体EGFP-shRNA进行干扰片段前体的转录,进而生成成熟的干扰片段,靶向小鼠BMP4基因使其发生沉默.所得到的转基因小鼠及其杂交后代经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明外源基因准确无误地整合到小鼠基因组.Northern杂交结果证明,小干扰RNA在皮肤组织中有较高水平的表达,在肺和肠组织中有较低水平的表达.研究结果表明,利用PolⅡ型（K14）启动子驱动shRNA融合转录本的表达,在特定组织高表达siRNA,从而达到抑制特定组织目的基因表达的技术路线是可行的.同时为利用K14启动子进行毛囊相关基因干扰研究积累了基础数据,为制备组织特异抑制基因表达的转基因大家畜提供了一个参考方法.
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| 关 键 词： | 组织特异 RNAi 转基因小鼠模型 |
Tissue-Specific RNAi Expression in Transgenic Mice |
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| DAI Rong,SHEN SiJun,GAN ShangQuan,MAO QingQing,WAN PengCheng,GUO Hong,MENG QingYong & LIU ShouRen College Animal Science & Technology,Shihezi University,Shihezi ,China.Tissue-Specific RNAi Expression in Transgenic Mice[J].Scientia Sinica Vitae,2011,41(4):289-295. |
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| Authors: | DAI Rong SHEN SiJun GAN ShangQuan MAO QingQing WAN PengCheng GUO Hong MENG QingYong & LIU ShouRen College Animal Science & Technology Shihezi University Shihezi China |
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| Institution: | DAI Rong1,2,SHEN SiJun1,GAN ShangQuan2,MAO QingQing3,WAN PengCheng2,GUO Hong1,MENG QingYong4 & LIU ShouRen2 1 College Animal Science & Technology,Shihezi University,Shihezi 832000,China,2 Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Xinjiang Academy of Agricultural and Reclamation Science,3 College Animal Science &Technology,Nanjing Agriculture University,Nanjing 210095,4 State Key Laboratory for Agrobiotechnology,China Agricultural University,Beijing 100193 |
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| Abstract: | Small interfering RNAs are short,double-stranded RNA molecules that can target mRNAs with complementary sequences for degradation. As a method for silencing of gene expression,RNAi is more simple and convenient compared with gene targeting. RNAi has been applied universally in research on gene function,treatment of disease and vaccine production. Accumulating evidence suggests that the Pol II promoter can be applied to RNAi. In this research,the human keratin 14 (K14) gene promoter was used to drive eGFP-sh... |
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| Keywords: | transgenic mouse RNAi tissue-specific |
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