番木瓜β-Gal基因RNAi双T-DNA植物表达载体的构建及其遗传转化的初步研究 |
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作者姓名: | 何玮毅 申艳红 卢秉国 陈晓静 潘东明 |
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作者单位: | 福建农林大学园艺学院,福州,350002;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,福州,350002;福建农林大学园艺学院,福州,350002;福建农林大学园艺学院,福州,350002;福建农林大学园艺产品贮运保鲜研究所,福州,350002 |
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基金项目: | 福建省科技厅重点项目,福建省自然科学基金 |
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摘 要: | 克隆了番木瓜(Carica papaya L.)果肉的细胞壁水解关键酶β-半乳糖苷酶(β-GAL)基因保守区,将其反向重复插入载体pKANNIBAL,构建RNAi中间表达载体pKAN/RG,将其上的发夹结构取代经改造的载体pCAMBIA 1300上hpt II基因,构建中间表达载体p1300~-/MFRG,分离单T-DNA区段,与载体pCAMBIA 2301构建RNAi双T-DNA植物表达载体p2301/TTRG.酶切分析和PCR检测表明,p2301/TTRG已被成功导入农杆菌EHA 105.通过遗传转化,初步获得了GUS染色呈阳性且具Kan抗性的番木瓜胚性愈伤组织.
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关 键 词: | 番木瓜 β-半乳糖苷酶 RNA干扰 双T-DNA植物表达载体 遗传转化 |
收稿时间: | 2008-08-04 |
修稿时间: | 2009-02-19 |
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