金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187的CHAP结构域的表达及抗菌活性分析

噬菌体裂解酶是一种高效的抗菌蛋白,系统地分析噬菌体裂解酶催化域的活性,有助于设计高效杂合裂解酶。合成噬菌体裂解酶Ply187的CHAP催化结构域(CHAPPly187)基因,并构建表达载体p ET28a-CHAPPly187转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达和两步纯化,获得高纯度的CHAPPly187,再与溶葡萄球菌酶催化域(CATLysn)进行活性比较。比浊法检测显示CHAPPly187和CATLysn对金黄色葡萄球菌都具有较强的抗菌活性;CHAPPly187具有更宽的抗菌谱,最适作用p H范围更大,对离子强度的耐受能力更好,易受EDTA的影响。低浓度的二价金属离子Ca2+、Mg2+、Mn2+对两种催化域都有明显的促进作用,低浓度的Zn2+、Cu2+、Fe2+对它们有很强的抑制作用。