检测重组人鼠嵌合抗VEGFR2单克隆抗体的ELISA方法的建立

目的:建立一种新型、快速定量检测食蟹猴血清中抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)单克隆抗体浓度的方法。方法:将特异性抗原VEGFR2-His包被在固相载体上,加稀释的受试药品血清,然后加入HRP标记的羊抗人IgG-(h+1),再加入TMB显色液,最后加入1 mol/L硫酸终止液,在酶标仪上用双波长读取D_(450/560nm)值。结果:建立了定量检测食蟹猴血清中抗VEGFR2单克隆抗体浓度的ELISA法,方法的线性范围为400~6.25 ng/m L,定量下限为6.25ng/m L,板内精密度介于-13.6%~8.3%,板间精密度介于-6.1%~6.3%,与Avastin、Actemra、Cetuximab均无交叉,室温稳定性及冻融稳定性良好,无稀释效应。结论:通过方法学的确证,本实验建立的方法可满足抗VEGFR2单克隆抗体在食蟹猴体内的药代动力学研究要求,可用于抗VEGFR2单克隆抗体的检测。