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| t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达 | |
| 作者姓名： | 涂宣林 朱运松 宋后燕 |
| 作者单位： | 上海医科大学分子遗传学研究室 上海 200032 |
| 摘 要： | 应用ＰＣＲ方法，在ｔ－ＰＡ ｃＤＮＡ５＇端引入合适的限制酶位点和酵母分泌信号肽，与酵母表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建表达质粒ｐＳＴＥ－Ｙ，利用ＬｉＣｌ转化法转化酵母菌ＹＳ１０８，在ＭＭ和ＭＤ平板上筛选表型，ＰＣＲ筛选ｔ－ＰＡ ｃＤＮＡ与酵母染色体整合而形成的阳性克隆，阳性克隆经甲醇诱导表达后，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证明表达产物的分子量为６ｋＤａ左右，用酪蛋白板溶圈法测定ｔ－ＰＡ的活性。Ｍｕｔ＾ｓ表型菌表 |
| 关 键 词： | 纤溶酶原激活剂 t－PA 酵母 cDNA 质粒 重组 |
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