| MIC3-EGFP融合蛋白真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 张琼,谭逵,蒋立平,谢荣华,范久波,舒衡平,吴翔.MIC3-EGFP融合蛋白真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达[J].现代生物医学进展,2008,8(5):825-828. |
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| 作者姓名： | 张琼 谭逵 蒋立平 谢荣华 范久波 舒衡平 吴翔 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅校区寄生虫教研室,湖南,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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湖南省重大专项基金
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湖南省重点学科建设经费资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建以绿色荧光蛋白(greenfluoreseeneeprotein,GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C2-MIC3并检测MIC3-EGFP融合蛋白其在COS-7细胞中的表达及定位.方法:通过基因重组的方法构建pEGFP-C2-MIC3重组真核表达质粒,并通过酶切和基因测序鉴定.脂质体法转染体外培养的COS-7细胞,转染后24h在活细胞状态下用倒置荧光显微镜直接观察MIC3-EGFP融合蛋白在COS-7细胞中的分布.结果:PCR检测,酶切鉴定及测序证实目的基因MIC3正确连接到pEGFP-C2的多克隆位点.pEGFP-C2-MIC3重组体转染COS-7后,在细胞质表达.结论:成功地构建了pEGFP-C2-MIC3融合蛋白真核表达质粒,在COS-7细胞中获得表达.
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| 关 键 词： | 刚地弓形虫 MIC3 GFP表达载体 表达定位 融合蛋白 重组真核表达质粒 细胞质 Cells Eukaryotic Expression Vector Fusion Protein 重组体 多克隆 正确连接 测序鉴定 酶切鉴定 结果 分布 直接观察 倒置荧光显微镜 状态 活细胞 体外培养 转染 脂质体法 |
| 文章编号： | 1673-6273(2008)05-0825-03 |
| 修稿时间： | 2008年2月10日 |
The Construction of MIC3-EGFP Fusion Protein in Eukaryotic Expression Vector and Its Expression in COS-7 Cells |
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| ZHANG Qiong,TAN Kui,JIANG Li-ping,XIE Rong-hua,FAN Jiu-bo,SHU Heng-ping,WU Xiang.The Construction of MIC3-EGFP Fusion Protein in Eukaryotic Expression Vector and Its Expression in COS-7 Cells[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(5):825-828. |
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| Authors: | ZHANG Qiong TAN Kui JIANG Li-ping XIE Rong-hua FAN Jiu-bo SHU Heng-ping WU Xiang |
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