| 红色荧光蛋白在丝状真菌里氏木霉中的表达 |
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| 引用本文： | 刘刚,李云,张燕. 红色荧光蛋白在丝状真菌里氏木霉中的表达[J]. 生物技术, 2006, 16(6) |
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| 作者姓名： | 刘刚 李云 张燕 |
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| 作者单位： | 深圳大学生命科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室,广东,深圳,518060 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助(“丝状微生物生长机理和生长动力学模型研究”,No.20206017) |
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| 摘 要： | 目的:建立红色荧光蛋白在里氏木霉中的表达方法,为深入研究里氏木霉中纤维素酶的合成机理打下基础。方法:采用PCR方法分离了里氏木霉纤维二糖水解酶Ⅰ(CBHⅠ)的启动子(Pcbh1)和终止序列(Tcbh1),将这两个片段与红色荧光蛋白(DsRed)的基因连接,得到Pcbh1-DsRed-Tcbh1表达盒。用此表达盒和质粒pAN7-1对里氏木霉QM9414的原生质体进行共转化,并用含100μg/ml潮霉素B的选择性平板进行筛选。结果:经筛选得到20个抗性转化子,在乳糖的诱导下有5个转化子可以表达红色荧光蛋白。对插入片段进行了扩增和序列测定,结果表明DsRed通过同源重组整合到了转化子的基因组DNA上,并处于cbh1启动子的下游。结论:通过cbh1启动子可以实现红色荧光蛋白在里氏木霉细胞内的稳定表达。
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| 关 键 词： | 红色荧光蛋白 纤维素酶 纤维二糖水解酶 里氏木霉 |
Expression of the Red Fluorescent Protein in the Filamentous Fungus Trichoderma reesei |
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| LIU Gang,LI Yun,ZHANG Yan. Expression of the Red Fluorescent Protein in the Filamentous Fungus Trichoderma reesei[J]. Biotechnology, 2006, 16(6) |
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| Authors: | LIU Gang LI Yun ZHANG Yan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | red fluorescent protein cellulase cellobiohydrolase Trichoderma reesei |
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